ELISA(酶聯免疫吸附測定，酶聯免疫吸附測定試劑盒)法的基本原理是酶分子與抗體或抗抗體分子共價結合，不會改變抗體的免疫學特性，也不會影響酶的生物活性。酶標記的抗體可以與吸附在固體載體上的抗原或抗體特異性結合。滴加底物溶液後，底物中的供氫體在酶的作用下可以由無色的還原型變為有色的氧化型，產生顯色反應。
因此，是否有相應的免疫反應可以通過底物的顯色反應來判斷，顯色反應的深度與樣品中相應抗體或抗原的量成正比。這種顯色反應可以通過ELISA(酶聯免疫吸附測定，酶聯免疫吸附測定試劑盒)檢測器進行定量測定，從而將酶化學反應的敏感性和抗原抗體反應的特異性結合起來，使ELISA(酶聯免疫吸附測定，酶聯免疫吸附測定試劑盒)成為一種特異而敏感的檢測方法。
常用瓊脂擴散或免疫電泳法，使抗原和抗體形成沉澱線，用PBS衝洗1天，然後用蒸餾水浸泡1小時，再將瓊脂凝膠片浸泡在酶底物溶液中顯色，如有應有的顯色反應，再浸泡在生理鹽水中，顏色仍不褪色，說明偶聯物既有酶活性又有抗體活性。
好的偶聯物研製出來後，瓊擴增效價要在1:16以上。另一種測定方法是用一係列稀釋的酶標抗體，用ELISA(酶聯免疫吸附測定法，酶聯免疫吸附測定試劑盒)直接滴定。該方法不僅可以測量標記效果，還可以測定酶標抗體的濃度。
